基质胶使用常见问题与操作指南②：类器官培养 & 血管生成实验避坑全攻略~

Q1

Q2

Q3

Q4

• 换液或移动培养板时操作过快、枪头触碰胶或加培养基时冲击力太大，导致胶滴破裂，建议轻柔操作，避免枪头碰到基质胶。

• 直接用低温培养基或未平衡至室温的培养基换液，基质胶受到温度的影响，凝胶结构变得松散，导致胶滴破裂，建议使用常温培养基加液（提前30 min常温放置培养基）。

• 胶滴体积太大，建议胶滴体积控制在10-30 μL。

• 基质胶稀释比例过大或加液前没有凝胶完全，建议基质胶比例控制在70%以上，在培养箱凝胶30 min。

Q5

• 操作过快或角度不当易将空气卷入形成气泡，避免快速上下吸打或剧烈震荡，推荐采用吸二档、打一档的方式减缓液流冲击，吹打动作要轻柔；

• 温度升高使基质胶黏稠度增加，更易在混匀过程中产生气泡，建议全程插碎冰里维持低温。

• 如已产生气泡，可轻拍容器底部将其排出，以确保细胞均匀分布和实验结果稳定性。

Q6

• 货号 082703 与 082755 均为低因子处理的基质胶产品，二者的核心差异在于类器官培养质控标准不同：

• 082703 为常规低因子基质胶，满足基础类器官培养需求； 082755 在上市前，经过了7 代类器官传代培养质检，每一代均验证其对类器官生长的适配性，确保性能稳定，更适配类器官长期传代研究。

Q1

• 确认细胞状态：是否为可成管细胞，如果细胞状态不好，建议先用培养基调整好细胞状态之后再进行成管实验。

• 细胞量：细胞太多，可见细胞连成片;细胞太少，可见细胞之间没有完全连成丝，断断续续连接。建议实验前进行预实验，摸索合适的血管生成细胞量。

• 基质胶：确认基质胶铺胶体积，建议通过预实验摸索基质胶铺胶量。加胶铺板时注意平整，无气泡；加细胞混悬液前注意基质胶凝胶程度；确定基质胶的质量良好；加细胞混悬液时注意力度，避免把胶吹起来。

Q2

基础培养基：基质胶（082704）=1：2比例；等待15-20 min凝胶。

Q3

Q4

可能原因分析：

• 基质胶和培养基温差太大，导致气泡析出，建议先预热培养基，再加入培养基或者换液；

• 操作过程中加入培养基时，混入气泡。