【基质胶应用二】皮下成瘤实验
一.实验材料
细胞:B16-F10
培养基:含 10%FBS 的完全培养基
耗材:预冷枪头、预冷离心管
其他:胰酶,PBS,Matrigengel(ABW 货号:082704,批次 A 和批次 B 两个批次)
二. 实验步骤
A. 准备基质胶
1.4℃解冻 Matrigengel,实验前转移到冰盒中。(注意:同样要准备一些 4℃预冷的枪头用于吸取Matrigengel)
B. 制作细胞悬液
取对数生长期的细胞,经消化、离心、计数后,用无血清培养基稀释细胞,制成细胞悬液。分别按 1:3和 1:6 的比例稀释 C 品牌、ABW 品牌批次 A 和批次 B 三种基质胶,并最终调整细胞密度至 1×10 7个/mL。
C. 皮下接种细胞
1. 选取 6-8 周 C57BL/6 的雌性小鼠 18 只,每组 3 只。
2. 分别在小鼠后背左右两侧腋下接种 1×10 6个细胞。
3. 在 SPF 级屏障环境的条件下饲养 14 天。
D. 结果统计
14 天后取出肿瘤,称取重量。